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SPE柱有哪些分类,以及使用方法

点击次数:397 发布时间:2025-03-15

一、固相萃取(SPE)柱的分类

固相萃取柱的分类主要基于填料基质‌‌作用机理‌两个维度,具体如下:

(一)按填料基质分类

1‌、硅胶基质小柱

以硅胶为支撑基质,通过硅-氧-硅键连接,适用于极性化合物分离‌。

2、聚合物基质小柱‌

采用高分子聚合物(如聚苯乙烯-二乙烯苯)作为基质,pH适用范围广(全pH值),吸附位点多,应用领域更宽泛‌。

3‌、吸附型小柱‌

包括佛罗里硅土、石墨化碳、氧化铝等,用于特定类型化合物的吸附。

(二)按作用机理分类

‌1、正相固相萃取柱‌

*固定相‌:极性物质(如硅胶、氧化铝、硅镁吸附剂)‌。

*适用对象‌

:极性或中等极性化合物,通过氢键、π—π键等作用吸附目标物‌。

2、反相固相萃取柱‌

‌*固定相‌:非极性或弱极性物质(如C18、C8、苯基键合硅胶)‌。‌

*适用对象‌:中等到非极性化合物,通过范德华力吸附‌。

3、离子交换柱‌

‌*固定相‌:带电荷的树脂(如磺酸基阳离子交换柱、季铵基阴离子交换柱)‌。

*‌适用对象‌:带电化合物(如氨基酸、多肽),通过静电作用吸附‌。

4‌、螯合作用柱‌

*固定相‌:含螯合基团的填料(如乙二胺型、亚氨乙酸型)。

*适用对象:重金属离子吸附‌。

二、固相萃取柱的使用方法

(一)通用操作流程

1‌、活化(预处理)‌

‌*反相柱‌:先用甲醇或强极性溶剂润湿,再用去离子水或缓冲液平衡,确保填料充分湿润‌。

*‌正相柱‌:用样品所在的有机溶剂润湿(如正己烷)‌。

*离子交换柱‌:用去离子水或低离子强度缓冲液平衡‌。

2、上样‌

*将样品溶液缓慢通过活化后的SPE柱,目标物或杂质被吸附在填料上‌。

3‌、淋洗‌

*用弱溶剂冲洗,去除弱吸附的干扰物(如用5%甲醇水溶液淋洗反相柱)‌。

4、洗脱‌

*选择强溶剂(如甲醇、乙腈)将目标物从填料上洗脱并收集‌。

(二)不同应用场景的差异操作

1、保留目标物模式‌

*用于富集目标物时,淋洗步骤仅去除杂质,洗脱时收集目标物‌。

2、保留杂质模式‌

*用于去除杂质时,目标物直接通过SPE柱进入收集液,洗脱步骤用于去除吸附的杂质(如食品分析中去除色素)‌。

(三)注意事项

1、保持填料湿润:若活化后填料变干,需重新活化‌。

2、控制流速:过快会导致吸附不充分,一般通过真空泵或注射器手动调节‌。

3、洗脱溶剂选择:需与目标物极性匹配,反相柱多用有机溶剂,正相柱用中等极性溶剂‌。





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